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Aplicaciones a la Mejora de la Utilización Nutritiva del Alimento en Cíclidos Cultivados en México, Apuntes de Nutrición

Tipo: Apuntes

2018/2019

Subido el 09/07/2019

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Uscanga-Martínez, A. et al. 2011. Aplicaciones a la mejora de la utilización nutritiva de l alimento en cíclidos cultivados en México. En: Cruz-Suárez, L.E.,
Ricque-Marie, D., Tapia-Salazar, M., Nieto-López, M. G., Villarreal-Cavazos, D. A., Gamboa-Delgado, J., Hernández-Hernández, L. (Eds), Avances en
Nutrición Acuícola XI - Memorias del Décimo Primer Si mposio Internacional de Nutrición Acuícola, 23-25 de Noviembre, San Nicolás de los Garza, N. L.,
México. ISBN 978-607-433-775-4. Universidad Autónoma de N uevo León, Monterrey, México, pp. 46-104.
Aplicaciones a la Mejora de la Utilización Nutritiva del
Alimento en Cíclidos Cultivados en México
Uscanga-Martínez, A.1, Moyano-López, F.J.2, Álvarez-González, C.A.3*,
Perales-García, N.1
1 Lab. de nutrición y producción acuícola, Campus del Mar, Universidad de Ciencias
y Artes de Chiapas, Tonalá, Chiapas. México. 2 Departamento de Biología
Aplicada, Escuela Politécnica Superior. La Cañada de San Urbano, Universidad de
Almería, 04120, Almería, España. 3 Lab. Acuacultura, División Académica de
Ciencias Biológicas, Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, Carretera
Villahermosa-Cárdenas km. 0.5, Villahermosa, Tabasco, CP. 86039, México
E-mail: *alvarez_alfonso@hotmail.com
Resumen
El abastecimiento de materias primas para la fabricación de alimento se está dejando sentir, el aumento de la
demanda de ingredientes para la alimentación de peces se está enfocando en nuevas fuentes de proteínas, con
la finalidad de disminuir la inclusión de harina de pescado, por tal razón en los últimos años las
investigaciones pretenden enfocarse en la evaluación de fuentes de proteína de origen vegetal y animal. El
presente trabajo pretende dar a conocer los avances en la investigación de nuevas alternativas alimenticias
para la nutrición de peces, evaluando su digestibilidad, grado de inhibición, y evaluación de enzimas
digestivas a través del tracto intestinal, dando como resultado que la hidrólisis de la proteina en especies como
castarrica (Cichlasoma uruptalmus) muestran una mayor digestibilidad al sorgo, estos se debe a que los
hábitos alimenticios de estas especie es omnivora, en el caso de las tenguayacas (Petenia splendida) se
observo que los peces tienen mayor digestibilidad a las harinas de fuente animal por tener hábitos carnívoros ,
y con ello tener nuevas alternativas de fuentes de proteína para la fabricasion de piensos altamente digeribles
que con ello se cubren varios aspectos como tener las fuentes proteínas a menor costo y obtener piensos que
se han mas amigables con el medio ambiente. Los resultados para la inhibición enzimática muestran que los
extractos de los ciclidos frente a concentraciones crecientes de harinas reflejan que la harina de sorgo presenta
los mayores niveles de inhibición sobre las proteasa alcalinas de la tenguayaca alcanzando un porcentaje de
inhibición del (60%) a partir de una concentración de 1.2 mg/ml de harina. En la evalución de eficiencia de
proteína los resultados obtenidos en ambas enzimas tripsina y quimotripsina muestran un valor de 25.04 ±
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Uscanga-Martínez, A.Ricque-Marie, D., Tapia-Salazar, M., Nieto-López, M.G., Villarreal-Cavazos, D. A., Gamboa-Delgado, J., Hernández-Hernández, L. (Eds), Avances en et al. 2011. Aplicaciones a la mejora de la utilización nutritiva del alimento en cíclidos cultivados en México. En: Cruz-Suárez, L.E.,

Aplicaciones a la Mejora de la Utilización Nutritiva del

Alimento en Cíclidos Cultivados en México

Uscanga-Martínez, A.^1 , Moyano-López, F.J.^2 , Álvarez-González, C.A.3*,

Perales-García, N.^1

1 Lab. de nutrición y producción acuícola, Campus del Mar, Universidad de Ciencias y Artes de Chiapas, Tonalá, Chiapas. México. 2 Departamento de Biología Aplicada, Escuela Politécnica Superior. La Cañada de San Urbano, Universidad de Almería, 04120, Almería, España. 3 Lab. Acuacultura, División Académica de Ciencias Biológicas, Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, Carretera Villahermosa-Cárdenas km. 0.5, Villahermosa, Tabasco, CP. 86039, México E-mail: *alvarez_alfonso@hotmail.com

Resumen

El abastecimiento de materias primas para la fabricación de alimento se está dejando sentir, el aumento de la demanda de ingredientes para la alimentación de peces se está enfocando en nuevas fuentes de proteínas, con la finalidad de disminuir la inclusión de harina de pescado, por tal razón en los últimos años las investigaciones pretenden enfocarse en la evaluación de fuentes de proteína de origen vegetal y animal. El presente trabajo pretende dar a conocer los avances en la investigación de nuevas alternativas alimenticias para la nutrición de peces, evaluando su digestibilidad, grado de inhibición, y evaluación de enzimas digestivas a través del tracto intestinal, dando como resultado que la hidrólisis de la proteina en especies como castarrica ( Cichlasoma uruptalmus ) muestran una mayor digestibilidad al sorgo, estos se debe a que los hábitos alimenticios de estas especie es omnivora, en el caso de las tenguayacas ( Petenia splendida ) se observo que los peces tienen mayor digestibilidad a las harinas de fuente animal por tener hábitos carnívoros, y con ello tener nuevas alternativas de fuentes de proteína para la fabricasion de piensos altamente digeribles que con ello se cubren varios aspectos como tener las fuentes proteínas a menor costo y obtener piensos que se han mas amigables con el medio ambiente. Los resultados para la inhibición enzimática muestran que los extractos de los ciclidos frente a concentraciones crecientes de harinas reflejan que la harina de sorgo presenta los mayores niveles de inhibición sobre las proteasa alcalinas de la tenguayaca alcanzando un porcentaje de inhibición del (60%) a partir de una concentración de 1.2 mg/ml de harina. En la evalución de eficiencia de proteína los resultados obtenidos en ambas enzimas tripsina y quimotripsina muestran un valor de 25.04 ±

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3.70 y 24,41 ± 1,26 unidades, respectivamente, mientras que en el intestino posterior este es de (2,39 ± 1,00 y 4,90 ± 1,28 unidades, respectivamente). Después del tiempo de hidrólisis el 10 % de los aminoácidos presentes fueron liberados

Palabras clave: eficiencia enzimática, digestibilidad, hidrólisis, inhibidores, harinas.

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desarrollo y rentabilidad de los cultivos intensivos de peces depende, inevitablemente, del diseño y producción de dietas comerciales que satisfagan los requerimientos de nutrientes esenciales y sean aceptadas en cantidades adecuadas para asegurar un crecimiento óptimo (De la Higuera, 1987; Soler et al.., 2000).

La nutrición es uno de los factores más importantes en la acuacultura, y con una dieta adecuada se obtiene un mejor desarrollo de los organismos (Carrillo et al.., 1987; Barletta, 2001). La determinación de los requerimientos nutricionales, y principalmente los proteínicos, es uno de los aspectos más importantes a considerar para la alimentación de los peces (Catacutan, 2001; Moon et al.., 2001; Ng et al.., 2001; Kim y Sang-Min, 2005), dada la importancia que tienen las proteínas y los aminoácidos en las numerosas funciones que éstos realizan (Barroso et al.., 1994; Kang-Woong et al.., 2004; Ali y Jauncye, 2005). La nutrición genera los mayores costos, más de la mitad de la operación del cultivo, por lo tanto es importante el conocimiento en la nutrición y la alimentación práctica ya que es esencial para el éxito en la acuacultura (National Research Council, 1993; Sang-Min et al.., 2000; Kim et al.., 2001; Meyer y Machado, 2004; Ng et al.., 2003; Cho et al.., 2005). Los requerimientos nutricionales de todas las especies acuáticas cultivadas pueden clasificarse en cinco diferentes grupos de nutrientes; proteínas, lípidos, carbohidratos, vitaminas y minerales (Tacon, 1994; Wing y Silas, 1994; Hernández, 2000). Los estudios sobre los requerimientos nutricionales son necesarios para la formulación de dietas adecuadas para cada estadio de desarrollo del organismo, tomando en cuenta el conocimiento de sus hábitos alimenticios y características físicas preferenciales de su dieta (D´ Abramo y Novell, 1991; Kim et al.., 2002).

Las proteínas, al ser el componente básico de los tejidos, son esenciales para el mantenimiento y el crecimiento (Hepher, 1993). Constituyen alrededor del 50 % del peso seco de las células y son fundamentales en todos los aspectos de la estructura celular y de su función, y además aportan los aminoácidos necesarios para un gran número de procesos bioquímicos (Carrillo et al.., 1987). Las proteínas son compuestos orgánicos complejos de elevado peso molecular, que contienen, al igual que las grasas y los carbohidratos, oxígeno,

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carbono e hidrógeno, y además tienen nitrógeno, y muchas de ellas azufre (Soler et al.., 2000). Estas moléculas contienen frecuentemente varias centenas de aminoácidos ya que estos son los constituyentes principales de la proteína y se caracterizan por poseer un grupo nitrogenado básico amino (-NH) y uno carboxilo (-COOH) (Curtis y Barnes, 2002). Se ha demostrado que para lograr el máximo crecimiento en los peces, los aminoácidos esenciales tienen que ser proporcionados en la alimentación ya que no pueden ser sintetizados por el organismo (Cowye, 1999). Sin embargo, los peces no tienen requerimientos de proteína cruda o absoluta, como lo describen Menghe Li et al.., (2003), sino que requieren ciertas cantidades de aminoácidos digestibles, mismo que está influido por varios factores como lo son la especie, la edad, la ración alimenticia, composición de la dieta y su contenido en energía digestible, y la temperatura del agua. Los peces cultivados en climas tropicales tienen un requerimiento de proteína más bajo (25 a 30 %) que los cultivados en climas moderados (30 a 40 %) (Hertrampf y Piedad-Pascual, 2000).

Una vez que la proteína es digerida o hidrolizada se liberan los aminoácidos, los cuales son absorbidos por el tracto intestinal y distribuidos a través de la sangre a todos los órganos y tejidos del pez (Soler et al.., 2000; Alam et al.., 2002). Las proteínas desempeñan gran diversidad de funciones, actúan como catalizadores, como elementos estructurales, en los sistemas contráctiles, como reserva de los elementos nutritivos y como vehículos de transporte; también actúan como hormonas y elementos de protección (Tacon, 1987; Lehninger, 1995). Desde el punto de vista de la nutrición, los requerimientos nutricionales desempeñan un papel importante, esta es la razón fundamental por la cual se estudian.

Una vez realizados estos estudio, se puede determinar la digestibilidad para la proteína, con el objetivo principal de maximizar el crecimiento y la supervivencia de los organismos al mínimo costo y en el menor tiempo posible (Knights, 1985). Sin embargo, para la elaboración de alimentos para la acuicultura, son innumerables las fuentes proteínicas que se utilizan; entre ellas destacan harinas y aceites de animales marinos, los cuales sirven de base para la formulación y fabricación de los pellets. Desafortunadamente, la mayoría de esas fuentes de proteína no son valoradas desde el punto de vista de la capacidad digestiva

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Este sistema fue desarrollado por Pedersen y Eggum (1983), el cual se basa en la medición del consumo de álcali necesario para mantener constante el pH que tiende a descender al romperse los enlaces peptídicos.

El parámetro determinado es el grado de hidrólisis (GH en %) que relaciona los enlaces peptídicos hidrolizados por las proteasas digestivas con el número total de enlaces peptídicos presentes en una proteína (Adler-Nissen, 1976). Al número de estos enlaces descompuestos en un proceso de hidrólisis se le denomina equivalentes de hidrólisis (h) y se expresa como mequv/g proteína. El valor de enlaces totales en una proteína se determina a través de su composición aminoacídica, como la suma de mmoles de aminoácidos por gramo de proteína. Desgraciadamente, la mayoría de los estudios se han aplicado a organismos terrestres, algunas especies de ciprínidos (Eid y Matty, 1989) y salmónidos (Grabner, 1985; Dimes y Haard, 1994).

Los cíclidos nativos son un recurso pesquero que debido a la sobreexplotación y a las modificaciones de su hábitat se considera deteriorada, ya que en los últimos años han sido sometidas a fuertes presiones de captura con lo que se ha provocado un agotamiento de los poblaciones silvestres. Esta problemática es evidente en las tallas que se ofrecen en el mercado, las cuales han disminuido. En este sentido, sería recomendable implementar alternativas de producción con el cultivo de estas especies, a la par de programas de manejo, que permitan restaurar las poblaciones naturales por medio del cultivo de peces ya sea para consumo o su liberación en los cuerpos de agua con el fin de reducir la presión sobre el recurso y ofrecer alternativas a las comunidades rurales. Además, que estas especies son consideradas como uno de los peces nativos con mayores posibilidades para su cultivo por las características biológicas y de manejo que presentan. Por otra parte, el Sureste de México presenta una alta demanda de este tipo de productos tanto para los mercados locales como regionales al tener una excelente tradición cultural de consumo. Por estas razones es imperativo conocer todos los aspectos biológicos básicos que permitan realizar el manejo adecuado durante su cultivo y por ende garantizar su rentabilidad. En la actualidad se cuenta con una amplia experiencia en investigación lo que indica que estas

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especies son un excelente candidato para ser cultivados, sin embargo existen lagunas del conocimiento que tienen que ser abordadas para lograr un éxito completo. El gran reto actual de la alimentación en especies acuáticas es encontrar un compromiso óptimo entre dos aspectos esenciales: de una parte, maximizar el rendimiento técnico de la producción, mediante el desarrollo de los alimentos más adecuados a las necesidades fisiológicas de cada especie en sus diferentes etapas de crecimiento. De otra, maximizar el rendimiento económico, mediante el desarrollo de los alimentos más adecuados desde una perspectiva tecnológica, considerando tanto el valor nutritivo como el costo, disponibilidad y facilidad de procesado de las diferentes materias primas.

En este contexto destaca de manera especialmente relevante la función del aparato digestivo. Su extraordinario papel es el de actuar como interfase entre el alimento y el organismo animal, dado que en él se lleva a cabo la manipulación inicial, hidrólisis y transferencia de los nutrientes hacia el interior del cuerpo. De aquí se deduce la gran importancia de obtener un conocimiento detallado sobre la función digestiva, dentro de la cual cumplen un papel primordial diferentes enzimas, cuyo funcionamiento se ve afectado por factores ligados tanto a la fisiología del animal como a las características del alimento o la forma en que este es suministrado. De entre los muchos factores estudiados hasta la fecha en relación con el funcionamiento de las enzimas digestivas (temperatura, salinidad, edad del pez, etc) existen algunos que determinan en buena medida la hidrólisis final de los sustratos y que no han sido hasta la fecha analizados con suficiente detalle. Este es el caso de:

  • El tiempo de reacción; es decir el tiempo que permanecen en contacto con los sustratos presentes en la digesta. Este tiempo está estrechamente ligado a la velocidad de tránsito digestivo.
  • La relación E:S; es decir, la cantidad de enzima que se pone en contacto con los sustratos correspondientes.
  • Las diferencias en la sensibilidad frente a los inhibidores presentes en los ingredientes vegetales.

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disponibilidad de recursos de agua en nuestro país: 11,500 km de línea costera, 3 millones de km^2 de la zona económica exclusiva, 358,000 km^2 de plataforma continental, y más de 2.9 millones de hectáreas de aguas continentales, incluyendo 1.6 millones de lagunas costeras (Paniagua y Lizarraga, 1995; Anguas, 2001). Hasta el momento las estadísticas de producción indican que predomina el cultivo de las especies de agua dulce. Del total nacional de la producción de peces, tilapia, carpa, bagre, trucha, charales y lobina representan más del 55% de la producción (SEMARNAP, 2000). Sin embargo, la mayoría de los cultivos de peces que se realizan en México son con especies exóticas como las tilapias y las carpas. La razón de la introducción de especies al país se debe en mayor grado al desconocimiento de la biología y potencial de cultivo de las especies nativas (Harfush, 1992). La situación de las especies nativas en algunos casos ha llegado a ser crítica como consecuencia de diversos fenómenos de competencia y depredación por parte de las especies exóticas introducidas en habitats naturales (Rojas y Mendoza, 2000). De las especies identificadas que conforman nuestra diversidad íctica, más del 90% son nativas mientras que el resto son introducidas. De las especies nativas se han hecho intentos aislados y poco organizados para desarrollar su tecnología de cultivo y las especies introducidas cuentan con un mayor conocimiento de sus tecnologías, aunque estas han sido desarrolladas en otros países y continentes, y tan solo se han adaptado a las condiciones de nuestro país (Lozano, 2000).

La necesidad de desarrollar sistemas de producción para la utilización de la ictiofauna nativa para su cultivo es de gran importancia, no solo como parte del patrimonio cultural y biológico de cada región, ó como fuente de alimentación y consumo, lo cual ya es relevante, sino también hacer un uso racional y sostenido de nuestras especies nativas ya que es evidente como se ha determinado a través del creciente número de casos en donde la introducción indiscriminada de organismos han tenido consecuencias negativas sobre la diversidad y composición de las especies y sobre la calidad en el medio que habitan, como promotor de crecimiento productivo, empleo y divisas, particularmente si se desarrolla en un contexto de mercado y rentabilidad, de manera que puede satisfacer la demanda regional existente y las crecientes oportunidades del mercado exterior (Mendoza, 1994).

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De esta forma, el impacto de las especies exóticas se refleja a nivel biológico (ecológico y genético) y socioeconómico, la base de datos sobre introducción de especies acuáticas, donde la FAO revela que la mayor parte de los efectos biológicos de especies introducidas han sido negativos, mientras que los impactos socioeconómicos han sido en su mayor parte positivos. Así, la alteración de los hábitats, la contaminación, la hibridación, la consanguinidad y la introducción de exóticos son actividades vinculadas a la acuicultura que conducen a la disminución de la biodiversidad en organismos acuáticos (Pérez, 1996; Soto et al.. , 2001; Pérez et al. ., 2003 ). De igual manera, se ha señalado que el desarrollo de las actividades de acuicultura fundamentada en especies exóticas puede ser un problema más que una solución (Pérez et al. ., 2000 y 2003). Recientemente en el país se han realizado estudios para lograr el cultivo de las especies nativas debido principalmente a la sobrepesca y por consiguiente la reducción en los volúmenes de captura, así como cambios en la estructura y composición de las comunidades acuáticas ( NOM-041-PESC-2004 ). De esta manera, los estudios para el cultivo de especies nativas pretenden disminuir la gran problemática en torno a su sobreexplotación como recurso pesquero en México, por lo que algunos de las especies más estudiadas son los cíclidos nativos, llamadas comúnmente mojarras, de las cuales las mas representativas en este sentido son las del género Cichlasoma y Petenia (Harfush, 1992). Las cuales indica que el alto potencial productivo de la tenguayaca Petenia splendida y castarrica Cichlasoma uruptalmus puede alcanzar a cubrir las demandas de la población, siendo estas especies las favoritas por los consumidores (Domínguez y Rodiles, 1998).

Tenguayaca.

La mojarra tenguayaca se distribuye desde el Sureste de México (Tabasco, Chiapas, Campeche y Quintana Roo), hasta Centroamérica. Es muy común en todo el estado de Tabasco sobre todo en lagunas, ríos y en lugares denominados popales (Resendez y Salvadores, 1983; Domínguez y Rodiles, 1998; Torres-Orozco, 1991). Es una especie tolerante a variaciones ambientales; se ha adaptado como un organismo resistente a

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intensidad se alimenta de restos vegetales, por lo que se determina que las tenguayacas en estadio juvenil son principalmente carnívoros, añadiendo mayor cantidad de vegetación a su dieta al convertirse en adultos. También se ha descrito que sus hábitos alimenticios son diurnos (Resendez y Salvadores, 1983; Caro et al.., 1994; Santiago et al.., 1997; Valtierra,

Castarrica

La distribución de esta especie abarca desde el sureste de México, en la porción media del estado de Veracruz, norte de Oaxaca, Tabasco, Campeche, Yucatán, ríos de Quintana Roo, hasta Centro América en Belice, Guatemala, Honduras y Nicaragua. Miller (1976) citado por Martínez (1987). Es un pez dulceacuícola que alcanza más de 30 cm de longitud y más de 400 g de peso, tiene cuerpo alto y comprimido, un solo par de orificios nasales en la cabeza, mandíbulas con dientes en forma de conos; el par central de dientes en la mandíbula superior es más grande que los demás, la línea lateral es interrumpida, tiene una sola aleta dorsal y una anal, la aleta caudal es redondeada.

Chávez et al.. (1989), mencionan que sus hábitos alimenticios son omnívoros con tendencia carnívora pero que utiliza igualmente los recursos más abundantes del medio donde se encuentra y se comporta como oportunista. Martínez-Palacios y Ross (1994), su dieta se compone, principalmente, de materia orgánica, crustáceos, camarones, anfípodos, moluscos, isópodos, poliquetos, huevos de invertebrados y restos tanto vegetales como de peces (Medina, 2003). Se describe a este pez con un color del cuerpo que varía de castaño rojizo a verde violáceo, con 7 bandas transversales azul oscuro o azul verdoso y una mancha de igual color en la base de la cola. La cabeza es verdosa mientras que la garganta y el pecho, son rojizos. Las aletas dorsal, caudal y anal son verdes y su borde es rojo; la dorsal presenta pequeñas manchas rodeadas de color rojo; las pectorales son amarillas. Crece y se reproduce en un amplio rango de ambientes, desde lagos de agua dulce hasta lagunas salobres y manglares.

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Tilapia

Pez dulceacuícola y estuarino, que alcanza hasta 50 cm. y 2 Kg. de peso, cuerpo alto y robusto, la cabeza es pequeña en relación con la longitud del cuerpo. Presenta escamas grandes y fuertes, la línea lateral es interrumpida (Morales 1991). La aleta anal tiene 3 espinas y de 8 a 11 radios, Presenta colores variables, pero en general, posee un color gris plateado uniforme, generalmente las tilapias poseen dientes en la boca y en la faringe, esta es una característica de las especies herbívoras, ya que éstos últimos son muy fuertes, lo que les permite mayor trituración del alimento, factor que les ayuda a su digestión (Pillay, 1993; Fitzsimmons, 1997). El sistema digestivo de la tilapia, se inicia en la boca, con dientes mandibulares continua en el esófago hasta el estomago. El intestino es de forma de tubo hueco y redondo que se adelgaza después del píloro, diferenciándose en dos partes, una inferior corta que corresponde al duodeno y una posterior y una posterior más grande de menor diámetro. El intestino es 7 veces más largo que la longitud total del cuerpo de pez, característica que predomina en las especies herbívoras (Egna 1997).

Evaluación de la eficiencia en la digestión enzimática de las proteínas en la tilapia Oreochromis niloticus

En los últimos años, un gran número de trabajos han sido enfocados a la caracterización del tipo y cantidad de enzimas presentes en el tracto digestivo en peces (Chan et al. 2004; Papoutsoglou y Lyndon 2005, Liu et al.. 2008), así como su respuesta a cambios en la composición de los alimentos (Applebaum y Holt 2003, 2006a Papoutsoglou y Lyndon; Cara et al.. 2007). Estos trabajos ofrecen información muy valiosa sobre las diferencias existentes de cada especie, entre las enzimas y su capacidad para hidrolizar sustratos específicos, este es en gran medida un factor clave para explicar las diferencias observadas en la digestibilidad de los principales nutrientes de alimentos. Sin embargo, el resultado neto de la función de la enzima depende de otros factores importantes, como su concentración relativa presente en el intestino del pez, así como el tiempo disponible para hidrólisis, siendo este último determinado por el tránsito de los alimentos. Se cree que la

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y la concentración de oxígeno se mantuvo en 6.40 (± 0.28 mg/L). Un 10% del volumen total de agua fue reemplazado diariamente. Se formularon dos dietas semi-purificadas con una composición similar (Tabla 1), las cuales se tiñeron, una de color blanco y otra de color verde oscuro al incluir una pequeña cantidad de talco en la primera y mientras que en la segunda se le agregó óxido de cromo. Cada dieta fue preparada mezclando todos los ingredientes secos en una batidora industrial (Samimic, modelo BM-11, Azpeitia, España) y después se agregó el aceite de pescado a la mezcla. Posteriormente se añadió agua hasta formar una masa dura, la mezcla se pasó a través de un molino de carne (BRAHER Internacional, modelo P 22 a 82). Obteniendo pellets de 2 mm los cuales se secaron a temperatura ambiente (25 ºC), siendo entonces embasados en bolsas de plástico y refrigerados a 5 ºC hasta su uso.

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Tabla 1. Composición de las dietas experimentales utilizadas para evaluar el tránsito de alimenticio en juveniles de tilapia Oreochromis niloticus.

Ingredientes (g 100-g dieta) Blanco Verde aCaseina 35 35 bSalvado de trigo 25 25 cAceite de pescado 10 10 dDextrina 17 17 eCarboximetil celulosa 5 10 fAlginato 2 2 gTalco 6 0 hOxido de cromo 0 1 aCaseina= EPSA, # Lote 270501703, fabricado en España bSalvado de trigo= Comercial, Almeria, España cAceite de pescado= AFANSA # ES.36.01.POL.-C dDextrina= Especialidades puma # Lote 070237 fabricado en España eCarboximetil celulosa= Walocel C, fabricado en Alemania fAlginato-lisina HCl= EPSA, fabricado en España gTalco= Panreac quimica, Sau # catalogo 141733. hOxido de cromo= Jalmek # catalogo C5260- 05

Protocolo de alimentación y medición de paso intestinal

Durante el período de aclimatación (10 días), los peces fueron alimentados con un pienso comercial dos veces al día. Antes del experimento, los peces se sometieron a un periodo de inanición durante 24 horas para asegurarse de que el tracto digestivo se encontraran vacíos, realizándose pruebas preliminares de disección en ese momento, encontrando que todos los peces muestreados en el tiempo 0 presentaron intestinos vacíos. Los peces recibieron una primera alimentación a base de dieta verde (punto 0), transcurridos 120 minutos después se suministró una segunda alimentación constituida por la dieta blanca, y 480 min después una tercera alimentación constituida por dieta verde. La dieta suministrada fue del 1% del peso vivo de cada pez; ensayos previos demostraron que esta cantidad de alimento era suficiente para satisfacer el consumo de los peces.

Uscanga-Martínez, A.Ricque-Marie, D., Tapia-Salazar, M., Nieto-López, M.G., Villarreal-Cavazos, D. A., Gamboa-Delgado, J., Hernández-Hernández, L. (Eds), Avances en et al. 2011. Aplicaciones a la mejora de la utilización nutritiva del alimento en cíclidos cultivados en México. En: Cruz-Suárez, L.E.,

HCl, pH 8, 20 mM CaCl2). Los cambios en la absorvancia a 410 nm se registraron durante 3 minutos (Erlangeretal.1961). La actividad de la quimotripsina fue evaluado similar al anterior, con 100 mM de succinil-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitroanilida (SAPNA, sigma S7388) en solución tampón como sustrato. La Absorbancia a 410 nm se midió con un espectrofotómetro Ex Multiskan (Thermolab Sistemas, Helsinki, Finlandia). Una unidad de actividad fue definida como un 1 μmol de p-nitroanilina liberada por minuto de tripsina o quimotripsina segun sus respectivos sustratos.

La actividad total por peso de tejido se calculó tomando en cuenta el peso de cada porción de intestino, mientras que la eficiencia enzimática (EE) en cada sección del intestino se calculó de la siguiente manera:

EE = Actividad enzimática (1 μmol de p-nitroanilina X min - 1)^ X el tiempo de residencia de la digestión en determinada sección (en minutos)

Análisis estadístico

Los datos obtenidos sobre las diferencias en la actividad de la tripsina y quimotripsina (mU) en las diferentes secciones de intestino (IP e ID), fueron analizados con una ANOVA de una vía. Las diferencias entre las medias atP\0.05 se analizaron mediante la prueba de Tukey (Zar 1996). Empleando el Paquete de análisis Statistica versión 7.0 (software, Arizona, EE.UU.).

Resultados

Al momento de la disección todos los peces presentaron estómago lleno. Sin embargo, en los muestreos posteriores se observaron dos peces que presentaban un patrón anormal en la evacuación gástrica, los cuales se descartaron para los cálculos siguientes. El cálculo de la progresión de la digesta (en la parte delantera) a lo largo del intestino (LI) después de la alimentación en relación con el tiempo, se incluyó en una ecuación logarítmica (Figura 1).

Uscanga-Martínez, A.Ricque-Marie, D., Tapia-Salazar, M., Nieto-López, M.G., Villarreal-Cavazos, D. A., Gamboa-Delgado, J., Hernández-Hernández, L. (Eds), Avances en et al. 2011. Aplicaciones a la mejora de la utilización nutritiva del alimento en cíclidos cultivados en México. En: Cruz-Suárez, L.E.,

El tiempo para realizar el paso intestinal se calculó mediante la sustitución de ''Y'' en la ecuación por la longitud media del aparato digestivo obtenido de todos los peces muestreados (n = 50, 620 mm ± 15). El valor obtenido sobre el tiempo de progresión fue de 440 min (7.15 h). Además, el tiempo medio de paso de los alimentos a lo largo de cualquiera del IP o ID se estimó teniendo en cuenta su longitud media respectiva, siendo 320 y 250 minutos, respectivamente.

Tiempo de alimentacion (min)

0 100 200 300 400 500 600

Avance del alimento en el intestino (mm) 0

100

200

300

400

500

600

700

800 y=102.690.0030X R^2 =0.

Figura 1. Progresión del alimento con el tiempo en el intestino de juveniles de tilapia

La actividad de las dos proteasas alcalinas, la tripsina y la quimotripsina, fueron medidas en diferentes momentos después de la ingestión de alimentos en las dos secciones del intestino (IP e ID), las cuales se presentan en la figura. 2.

A pesar de las grandes variaciones individuales, se observa un incremento claro y progresivo en la actividad de la tripsina con respecto al tiempo registrado en el IP con valores significativamente más altos (p\0.05) a 360, 480 y 610 minutos en comparación con los tiempos iniciales. La Actividad máxima observada fue de casi 26 mU, alcanzando el máximo peso del tejido (TWT) 6 horas después a partir del tiempo 0 (estómago vacío). Esto