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aislamiento adn genomico biotecnologia bioquimica
Tipo: Monografías, Ensayos
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Idea principal: Se establece un protocolo de aislamiento de ADN genómico a partir de hojas de Myrciaria dubia “camu camu”, caracterizado por permitir obtener ADN de alta calidad y cantidad suficiente para análisis moleculares como el RAPD. Resumen: Myrciaria dubia “camu-camu”, una especie nativa de la Amazonía que genera frutos con elevado contenido de vitamina C y otras sustancias relevantes. No obstante, los estudios moleculares de esta planta son escasos, por falta de un protocolo reproducible para purificar sus ácidos nucleicos. El propósito de este trabajo ha sido implantar un protocolo para aislar el ADN genómico desde hojas de M. dubia, apropiado para estudio moleculares. El ADN se purificó con un protocolo modificado, la calidad y porción se estimó por espectrofotometría y electroforesis en gel de agarosa. Adicionalmente, la calidad se evaluó por medio de RAPD. El ratio de calidad (A260/A280) promedio del ADN ha sido 1.9±0.1 y el espectro de absorción UV/Vis presentó un exclusivo pico de máxima absorbancia a 260nm. Por medio de electroforesis el ADN ha sido completo y sin ARN. Además, la síntesis de ampliaciones RAPD nos indica ausencia de inhibidores para polimerasas. La concentración promedio del ADN ha sido 99±33 ng/μl y el rendimiento promedio ha sido 237±80 μg ADN/g hoja. En conclusión, se ha predeterminado un protocolo de aislamiento de ADN genómico a partir de hojas de Myrciaria dubia “camu camu”, caracterizado por permitirnos obtener ADN de alta calidad y porción suficiente para estudio moleculares como el RAPD. Palabras:
1. Botánico. Los botánicos estudian la vida de las plantas en todos sus estadios. Observan cómo y dónde crecen las plantas, estudian sus células, e investigan el impacto que los productos químicos y las enfermedades tienen sobre ellas 2. Nucleicos. Los ácidos nucleicos son grandes polímeros formados por la repetición de monómeros denominados nucleótidos, unidos mediante enlaces fosfodiéster. 3. Espectrofotometría. La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la concentración 4. Electroforesis. La electroforesis es una técnica que emplean los cientificos en el laboratorio utilizada para separar el ADN, el ARN, o moléculas o proteínas en base a su tamaño y carga eléctrica. Se
utiliza una corriente eléctrica para mover las moléculas y que se separen a través de un gel.
5. Polimerasas. La polimerasa es una enzima capaz de transcribir o replicar ácidos nucleicos, que resultan cruciales en la división celular (ADN polimerasa) y en la transcripción del ADN (ARN polimerasa). 6. RAPD. Los marcadores RAPD (Random Amplified Polimorphic DNA o fragmentos polimórficos amplificados al azar) fueron desarrollados como una manera alternativa para la detección rápida de polimorfismos entre individuos utilizando un solo iniciador de secuencia arbitraria y la amplificación de fragmentos al azar de ADN 7. Fluvial El término fluvial se utiliza en la geografía y en ciencias de la Tierra para referirse a los procesos asociados a los ríos, arroyos, a los depósitos y relieves creados por ellos 8. Polimórfico. En biología existe polimorfismo cuando en una población de la misma especie hay dos o más fenotipos claramente diferenciados, es decir, existe más de un morfo o fase. 9. Endonucleasas de restricción. Una enzima de restricción es aquella que puede reconocer una secuencia característica de nucleótidos dentro de una molécula de ADN y cortar el ADN en ese punto en concreto, llamado sitio o diana de restricción, o en un sitio no muy lejano a este. 10. Etilenodiaminotetraacético. El ácido etilendiaminotetraacético, también denominado EDTA o con menor frecuencia AEDT, es una sustancia utilizada como agente quelante que puede crear complejos con un metal que tenga una estructura de coordinación octaédrica.