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Cromatografia de: adsorción, de partición, en columna, en papel, líquida de alta eficiencia, gases, intercambio de gases y exclusión molecular. Factor de retención.
Tipo: Diapositivas
1 / 13
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En oferta
líquido
Procesos cromatográficos:
De acuerdo a la naturaleza de la
Fase estacionaria:
De acuerdo a la forma de la Fase Estacionaria:
CROMATOGRAFÍA DE ADSORCIÓN
Separación de acuerdo a la tendencia a adsorber
los compuestos orgánicos por la fase estacionaria.
Fenómeno de adsorción > tres variables
> adsorbente, disolvente y las
sustancias a cromatografiar.
Azúcar, almidón
Inulina
Carbonato de
sodio
+poder
Alúmina activada
Gel de sílice
activado
Óxido de magnesio
Hexano, éter de
petróleo
(^) Heptano
Ciclohexano
+poder
Mezcla de ácidos o bases
con agua, alcoholes o
piridina.
Agua
Adsorbentes:
Diluyentes:
CROMATOGRAFÍA DE ADSORCIÓN EN
COLUMNA
Gel de sílice y
alúmina
Columnas huecas de
vidrio
Descendencia por gravedad
o por presión
(cromatografía flash)
Adsorbente: 20 a 35g
por g de muestra
La más utilizada en
Química Orgánica
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA (TLC)
Adaptación de la
cromatografía de adsorción.
Capa delgada de gel de
sílice o alúmina adherida a
un soporte de vidrio
Cromatograma se introduce
al tanque de desarrollo que
contiene el eluyente
Luz UV , Yodo o
Óleum
Mediante manchas muestra grado de
pureza o el número de compuestos
en ella
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA
BIDIMENSIONAL
Utilizada para una mejor
separación de manchas.
Se realiza una CCF normal pero
colocando la muestra en una
esquina del cromatograma y
eluyendo dicha placa con un
disolvente A y luego uno B.
Diferente eluyente permite aumentar el
recorrido de las sustancias facilitando la
separación de las señales
Posible determinación de cronograma
bidimensional por comparación de
posición Rf con uno estándar
TLC PREPARATIVA
La muestra se aplica en
forma de banda lineal.
Las bandas de interés se
ponen de manifiesto
utilizando una técnica no
destructiva.
La banda de interés es
raspada y extraída con un
disolvente que después se
evapora para recuperar el
soluto.
Tiempo inferior al de una
cromatografía en columna.
CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA
EFICIENCIA-HPLC
Utilizada para análisis de
compuestos pesados:
pesticidas, aromáticos, etc.
Columna de la FE muy compacta
por su formación con partículas
muy pequeñas.
Separación basada en la
diferencia de velocidades de
migración entre los
componentes de la muestra y las
fases. Poder de separación miles de
veces mayor que una columna
simple.
El flujo a presión aplica entre 1500-
800psi.
CROMATOGRAFÍA DE GASES
Separa compuestos orgánicos
volátiles como hidrocarburos,
fenoles, disolventes, ácidos grasos,
etc.
FM= gas inerte.
sobre superficie sólida y FM= gas.
La muestra se inyecta en una corriente de
gas inerte.
Separación debida a la diferencia del perfil
de partición entre las fases (FMG y FES).
En el cronograma se observa una serie de
picos que cada uno representa una
sustancia de las eluidas en la columna.
CROMATOGRAFÍA DE EXCLUSIÓN
MOLECULAR
Separa sustancias que poseen volúmenes
o tamaños diferentes.
Fase Estacionaria formada por partículas
altamente porosas que permiten la
separación de los componentes en función
del tamaño de las moléculas
NO existe interacción entre la Fase Estacionaria
y el soluto.
Separación por tamaño de
partícula.
Las moléculas que superan el límite de los poro
serán las primeras en ser eluidas, esto se
conoce como “límite de exclusión”