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La técnica de uso de la Cámara Neubauer, un instrumento empleado para el rápido conteo de células o partículas en suspensión bajo un microscopio. Se detalla el proceso de realización del conteo, dimensiones de las cuadrículas y resultados obtenidos. Además, se mencionan las ventajas y desventajas de este método.
Qué aprenderás
Tipo: Diapositivas
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Integrantes: Garzon Veliz Mariana Hernández Aguilar Ana Paola Gpo: BT4- Materia: Microbiología Avanzada Docente: Amezcua Vega Claudia Fecha: 08 de noviembre del 2021
z Fundamento de la técnica
(^) Cámara de recuento. (^) Instrumento o dispositivo conocido como hemocitómetro utilizado para conteo rápido de células u otras partículas en suspensiones bajo el microscopio. Grueso portaobjetos de cristal En 3 secciones (Central y de soporte) Dividido en
z ¿Cómo se realiza? (^) Colocar un volumen de muestra (0.1 ml de cultivo). (^) Colocar 1 gota de colorante de contraste (Trypan Blue). (^) Llenar la cámara sin sobrecargarla (asegurar que el llenado sea homogéneo). (^) Tomar lamina cubreobjetos y colocar sobre la cámara suavemente. (^) Dejar reposar por 2 min. (^) Observar en microscopio con objetivos 40 y 100 x. (^) Iniciar conteo en cuadricula superior izquierda. (^) Contar al menos 10 campos y calcular el numero de microorganismos por ml o g de muestra original.
z Resultados que se obtienen (^) Si consideramos uno de los cuadrados grandes, el volumen contenido en éste será de: (^) 1 x 1 x 0,1 = 0,1 mm^3 = 10-4^ ml (^) Para contar las células se cambia al objetivo 40X. Se cuentan las células contenidas en todos los cuadrados medianos. (^) Hay que contar todas las celulas. (^) Si hemos contabilizado N células en uno de los cuadrados grandes, la concentración de nuestra muestra será: N x 10^4 cel/ml (^) Si se diluyo la muestra inicial, el factor de concentración- dilución (f): N x 10^4 x f cel/ml Suspensión celular inicial = Suspensión celular diluida x factor de concentración-dilución
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Referencias
