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Procedimiento de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) - Prof. Kaberga, Apuntes de Enfermería

El procedimiento experimental para realizar la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (pcr) en un laboratorio. Incluye información sobre los materiales de laboratorio necesarios, como micropipetas, tubos de pcr, centrífuga y termociclador. También detalla los pasos a seguir durante el procedimiento, como la preparación de la mezcla de reacción, la centrifugación y la configuración del termociclador. Además, se proporcionan imágenes que ilustran el desarrollo del experimento. Este documento sería útil para estudiantes universitarios que estén aprendiendo sobre técnicas de biología molecular y genética, así como para investigadores que necesiten realizar experimentos de pcr en sus proyectos.

Tipo: Apuntes

2023/2024

Subido el 21/06/2024

jose-nestor-lopez-quispe
jose-nestor-lopez-quispe 🇵🇪

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2. PROCEDIMIENTO DE REACCION EN CADENA POLIMERASA
(PCR)
2.1 Materiales de Laboratorio
Micropipetas de 10 – 100 μL
50 puntas de 10 -100 μL y de 100 -1000 μl
1 microcentrífuga16000 rpm
1 termociclador
1.5 mL de agua estéril
Plataforma de ADN Learning Center
1 muestra de ADN
1 kit - Mix de PCR (taq polimerasa, dNTPs, primer, Mg, agua) / muestras
alicotadas para cada mesa de trabajo
1 kit (primers)
2.2 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Lo primero que realizamos fue colocar en un tubo de PCR 25 μL de
solución de reacción final o mix de PCR (Agua, MgCl2, Primer R, Primer
F, dNTPS, Taq, ADN, tampón)
2. Luego centrifugamos de manera breve para mezclar bien los
componentes
3. Seguidamente en los eppendorf colocamos la solución de mix de PCR
dentro del termociclador, este ya estuvo previamente configurado por el
docente para realizar los ciclos de temperatura necesarios para la
amplificación.
4. Tras el proceso de amplificación (90’ min aprox), retiramos los tubos
eppendorf del termociclador y las conservamos a 4°C.
Imágenes del desarrollo del experimento
Imagen n°1
Procedimiento de PCR
Imagen n°2
Procedimiento de PCR
Imagen n°3
Procedimiento de PCR
Imagen n°5
Procedimiento de PCR
Imagen n°2
Procedimiento de PCR
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2. PROCEDIMIENTO DE REACCION EN CADENA POLIMERASA

(PCR)

2.1 Materiales de Laboratorio  Micropipetas de 10 – 100 μL  50 puntas de 10 -100 μL y de 100 -1000 μl  1 microcentrífuga16000 rpm  1 termociclador  1.5 mL de agua estéril  Plataforma de ADN Learning Center  1 muestra de ADN  1 kit - Mix de PCR (taq polimerasa, dNTPs, primer , Mg, agua) / muestras alicotadas para cada mesa de trabajo  1 kit (primers) 2.2 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

  1. Lo primero que realizamos fue colocar en un tubo de PCR 25 μL de solución de reacción final o mix de PCR (Agua, MgCl2, Primer R, Primer F, dNTPS, Taq, ADN, tampón)
  2. Luego centrifugamos de manera breve para mezclar bien los componentes
  3. Seguidamente en los eppendorf colocamos la solución de mix de PCR dentro del termociclador, este ya estuvo previamente configurado por el docente para realizar los ciclos de temperatura necesarios para la amplificación.
  4. Tras el proceso de amplificación (90’ min aprox), retiramos los tubos eppendorf del termociclador y las conservamos a 4°C. Imágenes del desarrollo del experimento Imagen n° 1 Procedimiento de PCR Imagen n° Procedimiento de PCR Imagen n° Procedimiento de PCR Imagen n° Procedimiento de PCR Imagen n° 2 Procedimiento de PCR