Pruebas bioquímicas aplicadas en el laboratorio, Diapositivas de Microbiología

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Pruebas bioquímicas de

identificación

La identificación de una cepa bacteriana proveniente de un aislamiento se fundamenta con diferentes combinaciones de características y diferentes criterios en la evaluación de similitudes.

Las pruebas bioquímicas convencionales, determinan la actividad de una vía metabólica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer lo metaboliza o no.

Se han desarrollado para demostrar en forma clara una determinada característica bioquímica Presencia o ausencia de una determinada actividad enzimática Grupos de enzimas Determinada vía metabólica Crecimiento a una determinada temperatura Crecimiento en presencia de inhibidores, etc.

No significan de ninguna

manera un estudio

profundo del

metabolismo bacteriano.

BBL, ENTEROTUBE II (Becton Dickinson). Es un sistema Enterobacterias, definida como bastones Gram -, aerobios o anaerobios facultativos no esporulados, oxidasa (-). Consiste en un tubo de plástico con 12 medios de cultivo contenidos en compartimentos individuales que se inoculan simultáneamente en una etapa y permiten la detección de 15 características bioquímicas.

OXI/FERM TUBE II, (Becton Dickinson). Es un sistema listo para usar para la identificación de bastones Gram -, aerobios o anaerobios facultativos, oxidasa (+). Consiste en un tubo de plástico de 12 medios de cultivo que permite la realización simultánea de 14 pruebas bioquímicas.

Las pruebas bioquímicas que se utilizan más frecuentemente

1. Enzimas vinculadas con la respiración oxidasa catalasa
2. Requerimientos de oxígeno OF Caldo tioglicolato

3. Descomposición de azúcares simples, ácidos orgánicos y otros Producción de ácido, y/o ácido y gas Detección de enzimas y vías metabólicas (RM-VP, esculina, ONPG – orto – n itrofenilgalactopiranosido.
4. Fuente única de carbono citrato malonato

7. Detección de exoenzimas (lecitinasa, proteasas, coagulasa, celulasas, etc)
8. Test de crecimiento o inhibición (temperatura, cloruro de sodio en alta concentración, antibióticos)
9. Otros (solubilidad en bilis, producción de pigmentos).

Pruebas de Identificación

rápidas

1. Prueba de la catalasa
2. Prueba de la coagulasa
3. Prueba de PYR
4. Prueba de oxidasa

catalasa

Prueba de la catalasa

Fundamento: Detecta la presencia de la enzima catalasa, el H 202 es producido por bacterias aerobias facultativas mediante reacciones no enzimáticas de reducción de flavoproteínas o por acción enzimática de radicales superóxido. Procedimiento: En portaobjetos colocar sobre una colonia unas gotas de H 202 3 %. H 2 0 2 H 2 0 + 0 2 Liberación de burbujas rápida y sostenida indica la producción de oxígeno molecular = prueba (+) Consideraciones: No Agar sangre (peroxidasa en los eritrocitos).