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Procedimento operacional padrão de espermograma.
Tipologia: Manuais, Projetos, Pesquisas
Oferta por tempo limitado
Compartilhado em 30/04/2020
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Espermocitograma, espermometria, seminograma e espermocultura.
2. APLICABILIDADE O exame e solicitado pelo médico urologista, médico especializado em reprodução e médico endocrinologista. O exame e processado por biomédicos e profissionais de análises clínicas especializados em reprodução. 3. APLICAÇÃO CLÍNICA O espermograma por ter três finalidades, como para avaliação de fertilidade, para avaliação de esterilidade pós-vasectomia e identificação de agentes infecciosos (espermocultura). 4. PRINCÍPIO DO TESTE O método consiste em estudo das propriedades físicas e químicas do sêmen, contagem de células e de espermatozóides de preferência em câmara de Makler, estudo de sua motilidade e morfologia, contagem dos espermatozóides, cultura em meios apropriados, identificação do microrganismo e antibiograma, se solicitado e Contagem de leucócitos no esperma. Será feito exame macroscópico logo após a liquefação do líquido seminal em banho Maria a 37ºC durante 1 hora, porém não há inconveniente executá-lo logo após a colheita, devendo mencionar as condições em que o exame foi realizado, ele é feito para obter o resultado do volume, cor, pH, viscosidade, tempo de liquefação e liquefação. O exame microscópio será realizado 1 hora após a colheita em liquefação a 37°C em banho maria para obter o resultado da motilidade, vitalidade, índice de motilidade, contagem global dos espermatozóides, no qual e usado a câmara de Neubauer. 5. AMOSTRA A amostra deve seguir os critérios de avaliação que são quantidade de amostra adequada, identificação correta, não ter usado preservativo, lubrificante e saliva para coletar a amostra, recipiente adequado para amostra e estéril. O preparo do paciente para todos os casos, são lavar o pênis com água e sabão neutro, principalmente a glande e o prepúcio e lavar também as mãos. Para a avaliação de fertilidade, o paciente deve estar em abstinência sexual (relações sexuais ou masturbações) entre 3 a 5 dias partindo de um dia com apenas uma relação sexual, o paciente de urinar e após coletar o material por masturbação com o cuidado de não perder nenhum volume da ejaculação total, o material não pode ser coletado em preservativo, pois a presença de espermicida paralisa todos os espermatozóides. Para avaliação de esterilidade pós-vasectomia, não há necessidade de abstenção sexual e pode ser coletado por masturbação ou em preservativo. Para identificação de agentes infecciosos, desinfetar também as mãos duas vezes com álcool 70º e não há necessidade de abstinência sexual, após urinar e coletar o material por masturbação para um frasco rigorosamente estéril, tomando o máximo cuidado para não contaminá-lo acidentalmente, ele não pode ser coletado em preservativo e o material não deve ser transportado para evitar contaminação exógena.
RA – POP – 001 Elaborado por: Juliana Oliveira de Barros Data: 0 8 /0 4 / 2020
Solução salina para diluição, Corante eosina e reagentes para coloração de Gram, nigrosina, bastão de vidro, fita reativa para determinar o pH, reagente de Leishman, tubos de ensaio e estantes, pipetas e ponteiras, câmara de Neubauer, lâmina e lamínula, microscópio, espectrofotômetro, banho maria, fitas reativas, placas de Petri, alça de platina, Ágar, estufa e capela.
7. PROCEDIMENTO/TÉCNICA 7.1 Exames macroscópicos: 7.1.1 Liquefação e tempo de liquefação Após a ejaculação no recipiente de coleta com o material, o sêmen é tipicamente uma massa coagulada, com o recipiente já no laboratório, espere uma hora para observar se houve liquefação completa do coágulo, caso isso não ocorra, registre e preparar uma solução salina tamponado com fosfato e depois dilua o sêmen com 10 Ul/ml dessa solução, logo em seguida pegue o bastão de vidro e misture, depois leva a amostra para a incubadora a 37°C por 10 minutos. 7.1.2 pH Pegue a amostra e misture bem com o bastão de vidro, em seguida espalhe uma gota do sêmen uniformemente na fita e aguarde em média 30 segundos, para fazer a comparação de cor da área do reagente com a faixa de calibração para obter o resultado. 7.1.3 Viscosidade Pegue a pipeta descartável e aspire suavemente uma parte da amostra e deixa que ela caia pela gravidade, sempre observando o comprimento do fio. Para realizar esse procedimento com outra técnica, pegue o bastão de vidro e insira na amostra e ao retirar observe o comprimento do fio que formará. 7.1.4 Volume Pegue a pipeta graduada e aspire todo o sêmen para medir a quantidade correta do volume. 7.1.5 Cor Faça a análise e verifique a cor e registre como branco opaco, cinza claro, marrom-avermelhada e amarela. 7.2 Exame Microscópio: 7.2.1 Motilidade Misture bem a amostra e remova uma alíquota imediatamente após a mistura, não permitindo que os espermatozoides fiquem fora de suspensão, misturar novamente a amostra de sêmen antes de remover a alíquota replicada, para cada réplica, prepare uma preparação úmida com aproximadamente 20 μm de profundidade, espere a amostra parar de derivar (em média 60 segundos) e examine a lâmina com ampliação de × 200 ou × 400 e avalie aproximadamente 200 espermatozoides por repetição para a porcentagem de diferentes categorias móveis e compare os valores da réplica para verificar se eles estão bem próximos. Se a diferença entre as porcentagens for aceitável, relate a porcentagem média para cada grau de motilidade (Progressiva, Não Progressiva e Imotilidade). Se a diferença for muito alta, pegue duas novas alíquotas da amostra de sêmen, e faça duas novas preparações e repita a avaliação e relate a porcentagem média de cada grau de motilidade para o número inteiro mais próximo. A motilidade é classificada da seguinte forma: - Motilidade progressiva: espermatozoides que se movem ativamente em direção reta ou em um grande círculo, independentemente da velocidade.
Propriedades físicas: Tempo de Liquefação < 60 minutos Liquefação Completa pH 7,0 – 8, 5 Volume 1,5 – 5,0 mL Cor Branco opaco, Cinza claro e Amarelo Viscosidade Normal (até 2 ,0 cm) Contagem: Contagem Global de Espermatozóides > 15 milhões/mL Total de Espermatozoides Ejaculado > 39 milhões/mL Motilidade: Motilidade ≥^ 40% Progressivos ≥ 32% Variáveis de Movimento: Velocidade Curvilíneas > 40 μm Velocidade em Linha Reta > 30 μm Velocidade Média de Progressão > 28 μm Amplitude de Deslocamento Lateral 1,8 a 4,0 μm Linearidade 58% Repetidão 8,0 – 14,0 Hz Frequência de Oscilação ≥^ 58% Vitalidade: Formas Vivas 58% Morfologia > 4, Total de espermatozoides analisados 200
Aspermia Ausência de células da espermiogênese e espermatozóides. Azoospermia É a condição em que não se encontram os espermatozóides, mas veem-se células da espermiogênese mais ou menos maduras. Necrospermia Morte completa dos espermatozóides. Oligospermia Diminuição global dos espermatozóides. (casos anormais). Teratospermia Alteração generalizada da cabeça dos espermatozoides. Normospermia Global de espermatozóides normais. Hiperespermia Aumento da global de espermatozóides. (Geralmente não é patológica) Normo, Hiper e Hipocinesia Estão relacionados com a motilidade dos espermatozóides. Astenospermia Diminuição dos espermatozóides móveis, fato que geralmente acompanha a hipocinesia.