Dosagem bioquímica do sangue, associada ao exame clínico é essencial ao diagnóstico. Os testes bioquímicos são utilizados com a finalidade de avaliar as múltiplas funções metabólicas desempenhadas pelos órgãos e tecidos do corpo.

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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS -

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AULA ____

DATA:

______/______/______

VERSÃO:01

BIOQUÍMICA CLÍNICA

AULA 2

NOME: MATRÍCULA:

CURSO: POLO:

PROFESSOR ORIENTADOR:

DOSAGEM BIOQUÍMICA EM SORO

Dosagem bioquímica do sangue,associada ao exame clínico é essecial ao diagnóstico.Os

testes bioquímicos são utilizados com a finalidade de avaliar as multiplas funções

metabólicas desempenhadas pelos órgãos e tecidos do corpo. As dosagens bioquímicas

podem ser realizadas com o soro sanguíneo, que oferecem resultados imediatos e

satisfatórios, com fácil interpretação.

UREIA

Como a ureia é uma substância filtrada e eliminada pelos rins, as dosagens da ureia são

realizadas para avaliar as funções renais. E por ser um exame de sangue comum, não há

restrições para a dosagem de ureia, não é necessário jejum, privação de sono, de atividade

física ou qualquer outra recomendação especial.

A. Descrever como ocorre a metodologia realizada (é necessário descrever a

reação química)

O procedimento de dosagem bioquímica no soro do sangue e feito da seguinte forma:

Inicia o processo colhendo o material biológico (sangue) por punção venosa, sendo

5ml de sangue em tubo seco ou de gel. Feita a coleta leva-se para o centrifugador

com rotação de 3500 por minuto, por 3 minutos, para obtenção do soro.

Em seguida, nomear-se os três tubos como: branco, teste e padrão. Onde em cada

tubo será adicionada 1000 microlitros do reagente 1 que contém enzima. No tubo 2

coloca 10 microlitros do reagente 2 (padrão) que possui valores conhecidos. No tubo

3 adiciona 10 microlitros do soro do paciente. É necessário realizar a agitação

vigorosa dos três tubos e incubar em banho Maria a 37°C durante 10 minutos.

Em seguida leva-se os tubos para o aparelho de absorbância no espectrofotômetro

– observando qual absorbância para o respectivo teste.

A avaliação deverá ocorrer antes dos 30 minutos devido a estabilidade da cor, é

necessário após concluir realizar o cálculo que divide a absorbância do teste pela

absorbância do padrão X 70.

Material necessário para coleta do material biológico:

Luvas;

Garrote;

Agulhas;

Adaptador de agulha (coleta à vácuo);

Tubos para coleta à vácuo (Seco/Gel);

Álcool 70%;

Algodão;

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______/______/______ VERSÃO: BIOQUÍMICA CLÍNICA AULA 2 NOME: MATRÍCULA: CURSO: POLO: PROFESSOR ORIENTADOR: DOSAGEM BIOQUÍMICA EM SORO Dosagem bioquímica do sangue,associada ao exame clínico é essecial ao diagnóstico.Os testes bioquímicos são utilizados com a finalidade de avaliar as multiplas funções metabólicas desempenhadas pelos órgãos e tecidos do corpo. As dosagens bioquímicas podem ser realizadas com o soro sanguíneo, que oferecem resultados imediatos e satisfatórios, com fácil interpretação. UREIA Como a ureia é uma substância filtrada e eliminada pelos rins, as dosagens da ureia são realizadas para avaliar as funções renais. E por ser um exame de sangue comum, não há restrições para a dosagem de ureia, não é necessário jejum, privação de sono, de atividade física ou qualquer outra recomendação especial. A. Descrever como ocorre a metodologia realizada (é necessário descrever a reação química) O procedimento de dosagem bioquímica no soro do sangue e feito da seguinte forma:  Inicia o processo colhendo o material biológico (sangue) por punção venosa, sendo 5ml de sangue em tubo seco ou de gel. Feita a coleta leva-se para o centrifugador com rotação de 3500 por minuto, por 3 minutos, para obtenção do soro.  Em seguida, nomear-se os três tubos como: branco, teste e padrão. Onde em cada tubo será adicionada 1000 microlitros do reagente 1 que contém enzima. No tubo 2 coloca 10 microlitros do reagente 2 (padrão) que possui valores conhecidos. No tubo 3 adiciona 10 microlitros do soro do paciente. É necessário realizar a agitação vigorosa dos três tubos e incubar em banho Maria a 37°C durante 10 minutos.  Em seguida leva-se os tubos para o aparelho de absorbância no espectrofotômetro

observando qual absorbância para o respectivo teste.  A avaliação deverá ocorrer antes dos 30 minutos devido a estabilidade da cor, é necessário após concluir realizar o cálculo que divide a absorbância do teste pela absorbância do padrão X 70. Material necessário para coleta do material biológico:  Luvas;  Garrote;  Agulhas;  Adaptador de agulha (coleta à vácuo);  Tubos para coleta à vácuo (Seco/Gel);  Álcool 70%;  Algodão;

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______/______/______ VERSÃO:  Blood Stop;  Kit de dosagem bioquímica (Ureia). Matérias e equipamentos utilizados para metodologia descrita:  Reagente 1 (não identifiquei);  Padrão (com dados conhecidos);  Amostra (Biológica);  Centrifuga;  Pipeta automática e ponteira;  Tubos de ensaio;  Banho Maria e Cronômetro;  Espectrofotômetro. B. Descrever os interferentes que podem ocorrer Fatores interferentes são quaisquer problema que pode afetar a qualidade da amostra e alterar a integridade do resultado. E ocorrem na metodologia do exame e podem ter interferências de uma substância ou um fenômeno na amostra ou problema no desempenho do método do exame, pode ser:

Erro na identificação da amostra;
Armazenamento inadequado;
Quantidade de reagente inadequado;
Substâncias interferentes – Lipemia, hemólise e ictiricia. C. Associar as alterações dessa dosagem com aspectos clínicos A determinação da ureia no sangue é um exame importante para avaliar a função renal, pois a ureia circulante deve ser filtrada e eliminada na ureia e quando há problemas a quantidade de ureia aumenta. De acordo com pesquisas; os valores de referência na dosagem da ureia normalmente são:  Para crianças até 1 ano: entre 9 e 40 mg/dl;  Para crianças acima de 1 ano: entre 11 a 38mg/dl;  Para adultos: entre 13 e 43 mg/dl. Quando observa-se um aumento na concentração de ureia no sangue e necessário “Alerta” e início rápido do tratamento para diminuir. Já quando encontra-se baixa é necessário observar fatores como: alimentação, desnutrição, gravidez ou insuficiência hepática. CREATININA A dosagem de creatinina no sangue, um exame simples e confiável e a doença renal crônica pode ser identificada bem antes do surgimento de qualquer sintoma A creatinina é uma proteína produzida pelo fígado assim, como a ureia em níveis elevados podem indicar insuficiência renal, infecção renal, desidratação ou problemas na gravidez; isso porque a creatinina também é filtrada e excretada pelos rins e quando não ocorre esse processo a creatinina produzida ficara no sangue em alta concentração.

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______/______/______ VERSÃO: recentes derivados da metodologia de Jaffe utilizam procedimentos que minimizam esses interferentes. Um avanço na dosagem de creatinina pode ser feito com o uso de métodos enzimáticos que, em geral, empregam enzimas degradantes da creatinina. Apesar de apresentar melhores resultados, o custo desse exame ainda é um limitante do seu uso na prática laboratorial. A química seca disponível no Brasil utiliza uma metodologia enzimática que permite o uso da formula MDRD e evita interferentes da metodologia picrato em meio alcalino”. C. Associar as alterações dessa dosagem com aspectos clínicos Como dito acima a dosagem da creatinina é uma importante ferramenta para detectar a insuficiência renal no início evitando assim complicações da patologia e os valores alterados podem indicar:  Insuficiência renal;  Necrose tubular;  Inflamação do glomérulo;  Doença renal crônica;  Desidratação;  Hipertireodismo. Dessa forma são adotados valores “normais” e valores alterados:  Homens: 0,6~1,3,0 mg/dl;  Mulheres: 0,50~1,1 mg/dl. Alterados: Mulheres: acima de 1,1 mg/dl; Homens: acima de 1,3 mg/dl. Quando encontram-se alterados pode apresentar danos ou complicações renais. ÁCIDO ÚRICO A dosagem de ácido úrico pode feita pela urina ou pelo sangue.O exame é útil para a identificação dos níveis do ácido, verificando, assim, a presença de gota ou a eficácia do tratamento. O ácido úrico é formado em nosso organismo devido ao metabolismo das purinas (proteínas de diversos alimentos) assim como a ureia e a creatinina o ácido úrico é eliminado pelos rins através da urina, uma parte continua circulando na corrente sanguínea. No entanto alguns fatores podem aumentar os níveis do ácido e prejudique a saúde como: capacidade dos rins ou excesso de proteínas. A. Descrever como ocorre a metodologia realizada (é necessário descrever a reação química) O procedimento para análise da dosagem do ácido úrico envolve as mesmas etapas, mudando apenas os reagentes a serem utilizados:  Inicia o processo colhendo o material biológico (sangue) por punção venosa, sendo 5ml de sangue em tubo seco ou de gel. Feita a coleta leva-se para o centrifugador com rotação de 3500 por minuto, por 3 minutos, para obtenção do soro.

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______/______/______ VERSÃO:  Em seguida, nomear-se os três tubos como: branco, teste e padrão. Onde em cada tubo será adicionada 1000 microlitros do reagente 1 que contém enzima. No tubo 2 coloca 10 microlitros do reagente 2 (padrão) que possui valores conhecidos. No tubo 3 adiciona 10 microlitros do soro do paciente. É necessário realizar a agitação vigorosa dos três tubos e incubar em banho Maria a 37°C durante 10 minutos.  Em seguida leva-se os tubos para o aparelho de absorbância no espectrofotômetro

observando qual absorbância para o respectivo teste.  A avaliação deverá ocorrer antes dos 30 minutos devido a estabilidade da cor, é necessário após concluir realizar o cálculo que divide a absorbância do teste pela absorbância do padrão X 7. Material necessário para coleta do material biológico:  Luvas;  Garrote;  Agulhas;  Adaptador de agulha (coleta à vácuo);  Tubos para coleta à vácuo (Seco/Gel);  Álcool 70%;  Algodão;  Blood Stop;  Kit de dosagem bioquímica (Ácido Úrico). Matérias e equipamentos utilizados para metodologia descrita:  Reagente 1 (não identifiquei);  Padrão (com dados conhecidos);  Amostra (Biológica);  Centrifuga;  Pipeta automática e ponteira;  Tubos de ensaio;  Banho Maria e Cronômetro;  Espectrofotômetro. B. Descrever os interferentes que podem ocorrer Os interferentes que podem apresentar no exame, seria fatores relacionamos a erro na coleta do material biológico, mais alterações fisiológicas a utilização de diuréticos, álcool, antineoplásicos, podem influenciar os níveis de ácido úrico no sangue. C. Associar as alterações dessa dosagem com aspectos clínicos Segundo pesquisas “Os valores de referência para o ácido úrico devem rondar os 3,7 a 8mg/dl. Todavia, por vezes, em algumas pessoas, podem revelar-se acima destes níveis. Quando tal acontece, ele acumula-se em vários pontos do organismo, sob forma de cristais, tendo consequências na saúde. Valores acima dos níveis de referência são significado de gota, que se caracteriza pela acumulação de cristais de ácido úrico nas articulações, com efeitos destrutivos, podendo ainda causar pedras nos rins, refere o médico de medicina geral e familiar à Revista Prevenir”.

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______/______/______ VERSÃO:  Pipeta automática e ponteira;  Tubos de ensaio;  Banho Maria e Cronômetro;  Espectrofotômetro. B. Descrever os interferentes que podem ocorrer A sensibilidade depende da concentração de proteína na amostra e o volume disponível; os interferentes pode estar relacionado a qualquer substância que provoca falso positivo e acaba interferindo a metodologia. Os interferentes mais comuns são (oxido-redução, formação de complexo, precipitação). C. Associar as alterações dessa dosagem com aspectos clínicos A dosagem das proteínas totais reflete ao estado nutricional do paciente, pois a mesma pode indicar doenças renais, hepáticas ou distúrbios. As principais causas de diminuição das proteínas totais são desnutrição grave, doenças hepáticas e doenças renais. Doenças hepáticas prejudicam a produção de albumina e de algumas globulinas no fígado. Determinados distúrbios renais são acompanhados de perda de proteínas na urina. Elevação das proteínas totais geralmente decorre do aumento da produção de anticorpos em algumas doenças infecciosas ou em alguns tipos de câncer. COLESTEROL TOTAL O colesterol funciona para a formação de sais biliares que contribuem para digestão das gorduras, por isso é no funcionamento do corpo. O colesterol total é o reflexo do colesterol bom (HDL) e do ruim (LDL) e do colesterol associado aos triglicerídeos (VLDL). A. Descrever como ocorre a metodologia realizada (é necessário descrever a reação química) O procedimento para análise da dosagem do ácido úrico envolve as mesmas etapas, mudando apenas os reagentes a serem utilizados:  Inicia o processo colhendo o material biológico (sangue) por punção venosa, sendo 5ml de sangue em tubo seco ou de gel. Feita a coleta leva-se para o centrifugador com rotação de 3500 por minuto, por 3 minutos, para obtenção do soro.  Em seguida, nomear-se os três tubos como: branco, teste e padrão. Onde em cada tubo será adicionada 1000 microlitros do reagente 1 que contém enzima. No tubo 2 coloca 10 microlitros do reagente 2 (padrão) que possui valores conhecidos. No tubo 3 adiciona 10 microlitros do soro do paciente. É necessário realizar a agitação vigorosa dos três tubos e incubar em banho Maria a 37°C durante 10 minutos.  Em seguida leva-se os tubos para o aparelho de absorbância no espectrofotômetro

observando qual absorbância para o respectivo teste.  A avaliação deverá ocorrer antes dos 30 minutos devido a estabilidade da cor, é necessário após concluir realizar o cálculo que divide a absorbância do teste pela absorbância do padrão X 200. Exemplo do cálculo: Absorbância do teste x CP 0,276 x 200 = 162mg/dl

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______/______/______ VERSÃO: Absorbância do padão 0, Material necessário para coleta do material biológico:  Luvas;  Garrote;  Agulhas;  Adaptador de agulha (coleta à vácuo);  Tubos para coleta à vácuo (Seco/Gel);  Álcool 70%;  Algodão;  Blood Stop;  Kit de dosagem bioquímica (Colesterol Total). Matérias e equipamentos utilizados para metodologia descrita:  Reagente 1 (não identifiquei);  Padrão (com dados conhecidos);  Amostra (Biológica);  Centrifuga;  Pipeta automática e ponteira;  Tubos de ensaio;  Banho Maria e Cronômetro;  Espectrofotômetro. B. Descrever os interferentes que podem ocorrer Pode ocorre interferentes pré-analíticos como: posição, gênero, faixa etária, jejum, dieta, álcool e fumo, gestação, atividade física, medicamento em uso. São interferentes pré-analíticos que modificam o resultado. Pode considerar fatores durante o procedimento como erro de identificação da amostra ou troca dos reagentes – nesse caso ideal é fazer a dosagem. C. Associar as alterações dessa dosagem com aspectos clínicos O colesterol total é a soma de todos os valores do colesterol como dito acima HDL, LDL, VLDL e o balanceamento desses níveis definira a necessidade do tratamento. Segundo o site Tua Saude “Ter o colesterol total alto representa um risco elevado de doenças cardiovasculares e, por isso, seus valores não devem ultrapassar os 190 mg/dl”. Se for avaliar o exemplo acima o paciente estaria com colesterol total dentro do limite. Portanto o colesterol acima do limite gera acumulo de gordura nas paredes da veias e dificulta a passagem do sangue e prejudica a circulação. Por isso pode causar complicações como infarto ou AVC. COLESTEROL LDL Conhecido como colesterol “Ruim” é responsável pelo transporte de proteínas de baixa densidade do fígado para as células e veias, por isso que está relacionada a

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______/______/______ VERSÃO:  Banho Maria e Cronômetro;  Espectrofotômetro. Os interferentes pré-analíticos como: posição, gênero, faixa etária, jejum, dieta, álcool e fumo, gestação, atividade física, medicamento em uso. Outro fator a considerar durante o procedimento, são erros de identificação da amostra ou troca dos reagentes. COLESTEROL HDL O colesterol HDL é conhecido como “BOM” e está ligado a uma proteína de alta densidade que realiza o transporte reverso do colesterol, removendo o excesso dos tecidos e levando de volta para o fígado, mais seu excesso está relacionado a formação de pedras na vesícula. No colesterol HDL, os interferentes e a metodologia também são iguais colesterol total, pois o método é realizado da mesma forma, mudando apenas o reagente a ser utilizado como padrão da amostra.  Inicia o processo colhendo o material biológico (sangue) por punção venosa, sendo 5ml de sangue em tubo seco ou de gel. Feita a coleta leva-se para o centrifugador com rotação de 3500 por minuto, por 3 minutos, para obtenção do soro.  Em seguida, nomear-se os três tubos como: branco, teste e padrão. Onde em cada tubo será adicionada 1000 microlitros do reagente 1 que contém enzima. No tubo 2 coloca 10 microlitros do reagente 2 (padrão) que possui valores conhecidos. No tubo 3 adiciona 10 microlitros do soro do paciente. É necessário realizar a agitação vigorosa dos três tubos e incubar em banho Maria a 37°C durante 10 minutos.  Em seguida leva-se os tubos para o aparelho de absorbância no espectrofotômetro

observando qual absorbância para o respectivo teste.  A avaliação deverá ocorrer antes dos 30 minutos devido a estabilidade da cor, é necessário após concluir realizar o cálculo que divide a absorbância do teste pela absorbância do padrão X 200. Material necessário para coleta do material biológico:  Luvas;  Garrote;  Agulhas;  Adaptador de agulha (coleta à vácuo);  Tubos para coleta à vácuo (Seco/Gel);  Álcool 70%;  Algodão;  Blood Stop;  Kit de dosagem bioquímica (Colesterol HDL). Matérias e equipamentos utilizados para metodologia descrita:  Reagente 1 (não identifiquei);  Padrão (com dados conhecidos);

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DATA:

______/______/______ VERSÃO:  Amostra (Biológica);  Centrifuga;  Pipeta automática e ponteira;  Tubos de ensaio;  Banho Maria e Cronômetro;  Espectrofotômetro. Os interferentes também estão relacionados a fatores posição, gênero, faixa etária, jejum, dieta, álcool e fumo, gestação, atividade física, medicamento em uso. Podem alterar resultados nos resultados. Assim como a dosagem ser realizada de forma incorreta e apresentar erros de etapas ou identificações das amostras ou trocas de reagentes. REFERÊNCIA:

- https://brasilescola.uol.com.br/biologia/hdl-ldl.htm - https://www.minhavida.com.br/saude/tudo-sobre/18757-colesterol-total - https://saude.abril.com.br/medicina/exame-de-colesterol-total-e-fracoes-o- que-e-taxas-ideais-e-quando-fazer/ - https://hilab.com.br/blog/colesterol-hdl-ldl-triglicerideos/ - https://webcache.googleusercontent.com/search? q=cache:n7qB3HuZaucJ:https://www.laboratoriovidda.com.br/informativos/ - https://labtestsonline.org.br/tests/proteinas-totais-e-relacaoalbuminaglobulinas - http://www.hospitalsantaterezinha.com.br/exibir.php?id=992#:~: - https://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S - content/uploads/2016/09/CREATININA_POP.doc+&cd=2&hl=pt-BR&ct=clnk - https://fazumhilab.com.br/o-que-e-creatinina/ - http://www.rbac.org.br/artigos/biomarcadores-da-funcao-renal-do-que dispomo - https://labtest.com.br/wpcontent/uploads/2016/09/Ur %C3%A9ia_CE_27_Port.pdf - https://controllab.com/pdf/livro_sbpc_interferentes_2018.pdf - https://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1676- - https://www.minhavida.com.br/saude/tudo-sobre/18350-exame-de-ureia - https://www.bioclin.com.br/ureia-enzimatica-k047-1.html - https://kasvi.com.br/tubos-de-coleta-interferentes-sangue/ - https://cernitas.com.br/bioquimica/#:~:text=As%20dosagens%20bioqu %C3%ADmicas%20podem%20ser,espec%C3%ADfico% - https://www.laboratoriocenterlab.com.br/exame/acido-urico-dosagem-no soro/

https://www.prevenir.pt/saude/exames-e-analises/para-que-serve-a-analise- ao-acido urico/
http://hospitalsaomatheus.com.br/blog/tudo-sobre-acido-urico-o-que-e sintomas-e-porque-pode-estar-alto
http://civetudi.com.br/post/fatores-que-podem-induzir-erros-nos-valores- laboratoriais/
Aula Pratica do professor Fabio Fidellis