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Relatório de Estágio Supervisionado em Dispensação - Farmácia UNOPAR
Tipologia: Esquemas
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______/______/______ RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: Biologia Molecular DADOS DO(A) ALUNO(A): NOME:Juliana Rodrigues Damasceno MATRÍCULA: 01521564 CURSO: Farmácia POLO: Esperantina PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A):
1°Passo - para extração do DNA do morango foi; água destiladas, sal, detergente. 2° Passo - Colocar os morangos dentro de um saco plástico e macerá-los pressionando os morangos com os dedos até obter uma pasta quase homogênea e transferir a pasta de morango para um copo. 3° Passo – Em outro copo misturar 150ml de água, uma colher sopa de detergente e uma colher de chá de sal de cozinha. Mexer bem devagar com o bastão, (ter cuidado para não espumar.) 4° Passo – Colocar cerca de 1/3 da mistura de água, sal e detergente sobre o macerado de morango. Misturar levemente com o bastão de vidro. 5° Passo - incubar em temperatura ambiente por cerca de 30 minutos. Mexer de vezem quando com o mesmo bastão. 6° Passo – Colocar uma peneira sobre um copo limpo e passar a mistura pela peneira para retirar os pedaços de morango que restaram. 7° Passo – Colocar metade do liquido peneirado em um tubo de ensaio. Colocar apenas cerca de 3 dedos no fundo do tubo. 8° Passo – Despejar delicadamente no tubo (pela parede do mesmo), sobre a solução, 2 volumes ou 2 dedos de álcool comum. Não misturar o álcool com a solução. Aguardar cerca de 5 minutos para começar a precipitar na interfase. Depois dos 5 minutos o DNA vai boiar, depois colocar o bastão dentro e girar o palito na interfase entre a solução e o álcool.
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______/______/______ A eletroforese é um método de separação de moléculas que é baseado na aplicação de um campo elétrico em uma solução contendo as moléculas a serem separadas AS moléculas se movem através da solução em direções opostas, dependendo da sua carga elétrica. Para realizar a técnica da eletroforese, é necessário ter um gel de agarose, uma placa de eletroforese, uma fonte de energia, cabos elétricos e as amostras a serem analisadas. O primeiro passo é preparar o gel de agarose. Em seguida, as amostras são adicionadas as extremidades da placa de eletroforese e o campo elétrico é aplicado. As moléculas se movem através do gel em direções opostas, dependendo da sua carga elétrica Após algum tempo, as moléculas alcançam o final da placa e podem ser visualizadas por microscopia. A análise dos resultados permite que os pesquisadores determinem a composição e aslaracterísticas das moléculas. aparelho de eletroforese em gel consiste em um gel, que geralmente é feito de ágar ou poliacrilamida,e uma cuba para eletroforese (tipicamente uma caixa ou tanque de plástico rígido) com um cátodo (terminal negativo) em uma extremidade e um ânodo (terminal positivo) na extremidade. final oposto. gel, que contém uma série de poços na extremidade do cátodo, é colocado dentro da cuba de eletroforese e coberto com um solução tampão. As amostras são então carregadas nos poços com uma pipeta. A cuba de eletroforese está conectada a uma fonte de eletroforese que, quando ligada, aplica um campo elétricopara tampão. ) campo elétrico faz com que moléculas carregadas negativamente migrem através do gel em direção ao ânodo, (DNA e RNA são carregados negativamente; as proteínas devem ser tratadas com um detergente para dar-Ihes uma carga negativa). A eletroforese ocorre dentro de uma matriz ou gel que possibilita a corrida da amostra. O gel é introduzido dentro de uma solução tampão específica para eletroforese que fornece as condições ideais para a passagem da corrente e a manutenção do valor do pH. Em seguida, as amostras são pipetadas em pequenos poços feitos com um pente no gel. Para ocorrer a migração, a cuba e fonte de eletroforese exercem uma voltagem, corrente e potência constantes, esses fatores irão determinar o sucesso da técnica. E por fim, as bandas são visualizadas sob luz ultravioleta ou LED, através do equipamento chamado de transiluminador.